Sustitut Pasteur Doris, le 14 février 1080

25, RUE DU DOCTEUR ROUX
(XV? Arrand')

 

Téléphone : SEGUR 01-10 Dr. S. SPIEGELMAN
Dept of Bacteriology
University of Illinois
URBANA
Illinois

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Mon cher Sol}

Je te remercie pour l'orthonitrophényl galactoside qui va
nous rendre de trés grands services, Je t'ai fait envoyer, par
avion, I00 mg de notatine. Comme nous en fabriquons assez ré-
guliérement au laboratoire, je pourrai tten envoyer d'autre d'ici
quelque temps.

Pour l'emploi, il faut procéder de la maniére suivante :
faire une solution dans l'eau distillée & 2 mg/cc. Le produit
se dissout bien. I1 peut rester un léger trouble, et on peut
clarifier par centrifugation. Cette solution doit avoir une
activité correspondant & environ 100.000 mm? Of par heure, & 28,
pH 6,8, en tampon phosphate M/IO additionné de NaNz M/50. Le
pH optimum de la notatine est aux environs de 6, et on peut l'u-
tiliser aisément jusque vers pH 7,

Pour les mesures d'activité enzymatique (lactase, amylo-
maltase, etc..) on peut procéder de 2 facons différentes :

. a) systéme de 2 enzymes. Dans ce cas, la notatine et la
préparation enzymatique sont utilisées simultanément dans un
Warburg. I1 est essentiel pour obtenir de bons résultats que
l'activité potentielle de la notatine soit entre I0 et 20 fois
supérieure & l'activité de l'enzyme hydrolytique. On emploiera
par exemple 0,1-0,2 ce d'une solution de notatine & 2 mg/ee pour
une quantité de lactase libérant 25 yo de glucose par heure,
Yette technique rapide donne d'texcellents résultats et permet de
suivre la cinétique, mais elle est moins précise que la seconde
et utilise une plus grande quantité de notatine.

b) La seconde technique consiste & faire, dans un premier
temps, l'hydrolyse, et dans un second, aprés avoir détruit l'ac-
tivité enzymatique, & faire le dosage du glucose par la notatine
en Warburg.

L'échantillon que je t'envoie n'a pas d'activité sensible
sur d'autres sucres r7¢ le glucose, sauf le xylose, le maltose
et le tréhalose. Liactivite en maltose est excessivement faible, -

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et l'erreur peut étre facilement corrigée & l'aide d'un témoin.
L'activité sur xylose est également trés faible. L'activité en
tréhalose est notable, mais je ne pense pas que cela doive te
gener,

Michael me dit que vous avez eu du mal & préparer la nota-
tine. Si vous n'avez pas de souche bonne productrice, cela ne
me surprend pas. Nous n'avons réussi 4 1@ faire ici, que lorsque
nous avons eu entre les mains la souche de Coulthard. Maintenant,
nous arrivons &@ en préparer sans difficulté, réguliérement, des
lots de I50 mg & peu prés, obtenus & partir de IO litres de mi-
lieu de culture. La méthode suivie est essentiellement celle de
Coulthard, & ceci prés, que l'on ne fait pas de concentration
préalable. Pour les dilutions et les volumes de liquide, on
tient compte grossierement du fait qu'on a commencé avec I0 litres
au lieu de I50 comme le fait Coulthard. Je vais te faire envoyer
également la souche en question. J'espére cependant pouvoir or-
ganiser une production plus massive d'ici quelque temps, et je me
demande s'il n'y aurait pas avantage pour toi comme pour moi & ce
que je me spécialise dans la fabrication de la notatine, et toi
dans celle des galactosides.

Nous avons beaucoup de choses nouvelles ici. Je ne sais pas
ce que Michael a pu tien écrire déja. Comme cette lettre est
assez urgente, je remets & plus tard de plus amples commentaires.

J'ai été trés heureux d'apprendre Bar Micliael que tu étais
bien installé et que tu avais tout lieu d'étre satisfait des
moyens de travail mis & ta disposition.

Je crois que nous finirons par comprendre ce que c'est que
l'adaptation enzymatique, mais ce sera probablement bien autre
chose que ce que nous avions pu imaginer au début.

Bien amicalement a toi,

TVouy ase (eo wf

J. MONOD