PESQUIZAS SCIENTIFICAS NOVO PROCESSO DE «PJKlil DOS CMJHIS Dl ítíl-ltll sem auxilio do filtro a quente POR MONCORVO Filho /f/y/e c/e c/t/t/ta t/o deívtço 'dac/e 1 to/yeco c/a c/tn/ca c/e //e/ea/ita r/a //l/c/tt/tca c/o 3teo c/e /ane/le. tJ-Zidu/tn/e t/o /a /oía/oíco e/e 3/tcody.ea , /tientdlo r/o J/iettito c/od c/od tT/od/t/aed e ac/cca/ dcd/o//ecaito c/o ntedmo Jríettuo, e/c.. II MARÇO DE 1893 lvIO DE JANEIRO Typ. de if. (Barreiros & C., rua de S. Jose' n. 33 1893 PESQUIZAS SCIENTIFICAS NOVO PROCESSO DE mnutu nos (uk r ku-jhi sem auxilio do filtro a quente roii MONCORVO Filho t r/e c-Án/ca encatiej/ar/o r/o deivtço /uc/e ieo c/a c/tntca c/e //'/(a/ua t/a //o/tc/cri eca r/o 5teo r/e o/une/ic. t/tâiriid/en/e r/o /l aáoiw/oíto r/e t/jeo/ojpeay /siem/lo /o r/oj r/oJ c/éo-i/t(7^c/ed e acYua/ 6eZ/wZ/iecaUo /o 'inedmo '/yitrmeo, e/c.. ir MARÇO DE 1893 RIO DE JANEIRO Tyft. de . Barreiros & C., rua de S. Jose’ n. 35 1893 Novo processo de preparaçio dos caldos de agar-agar, sc.n auxilio di filtro a quente ó) Diante do grando numero de processos até aqui prupostos paru a preparação dos diversos meios de cultura dos micro-organismos, não será facil a olles adiantar qualquer modificação nuva. Não se deve, no entretanto, desconhecer as vantagens do um processo novo, quando, sem auxilio de apparelho especial, se chegue, por meio delle, ao mesmo resultado dos precedentemente conhecidos, ganhando-se por outro lado, enorme economia de tempo. Atè agora, a filtração da gelatina reclamava o emprego do filtro a quente, operação bastante longa e por demais penosa. Com o fim, porem, do evitar esto inconveniente, dois bacteriologistas havanen. ses, os Srs. A. Costa e Grande Iiossi propuzeram a decantação das “ C v/ninuni uri ) :i;ir ‘so:i.,i la .10 í 1? ri! j , om Feve- iviro de 1 4 impurezas da gelatina o sua soparação por meio de um fio de ferro. Este processo não foi portanto usado senão para os caldos de gelatina. Eu propuz-me, por meu lalo, procurar um processo de prepa- ração do agir-agar, em que, além da perfeita esterilização do meio nutritivo, houvesse a vantagem de ser obtida em um lapso de tempo muito inferior ao exigido para operações analogas. Passo a referir o modo porque procedo : Introluz-se em um crystallisador 255 grammas de carne fresca em fragmentos e ajunta-se um pezo equivalente de agua distillada. No fim de 1 hora, esta mistura é submetti la a ebullição, ten- do-se o cuidado de separar a espuma á proporção que ella se vai formando. Em seguida faz-se passar o liquido atravez de um panno de linho grosso, de maneira a prival-o do todas as matérias solidas ; esse liquido assim filtrado torna-se claro e transparente. Ajunta-se então: Peptôna solida 5 grammas Chloreto de sodio 5 grammas O liquido toma, desfarte uma cor avermelhada. Addiciona-se mais a mistura assim composta : Gelose 10 grammas Agua esterilisada 250 grammas; submette-se novamente á ebullição, e depois do seu resfriamento, alcalinisa-se com sulfato ou carbonato de sodio e clariíica-se com albumina de ovo. O liquido é em seguida filtrado atravéz de um paimo fino embe- bido d’agua distillada. O caldo preparado por este modo é intro- duzido em um recipiente de crystal do forma cyliudrica, fechado her- meticamente por uma rolha de cortiça envolvida em algodão liydro- philo, sendo finalmente o todo levado ao autoclave durante 20 minu- tos (sob 2 athmospheras). 5 Depois do resfriamento do apparelho, rotira-se o recipiente e colloca-se-o sobre uma mesa. ao abrigo das correntes do ar, deixan- do-o em repouso durante cerca de 2 horas, até que todas as impurezas contidas no caldo, ganhem o fundo do vaso. Este é então mergulhado em agua quente para auxiliar o descollamento do cylindro de agar; logo depois destapa-se o e volta-se-o vorticalmente sobro uma grande placa de vidro esterilisada o levantando-o delicadamente, deixa-so a descoberto o cylindro do agar, cujas impurezas occupam então a parte superior. Nada inais fácil, neste caso, do qie separai-as immoliata- mente por tneiode uma espatula esterilisada. Aparte restante é de novo introduzida no mesmo recipiente previamente esterilisado que se fecha em seguida, como fui antes feito, o que so celloca nova- mente, durante um quarto de hora, no antoclave (sob 1 athrno- spliera e meia). Antes que o resfriamento do apparelho seja completo, retira-se o recipiente, dosarrolha-se-o o doita-se o seu conteúdo, ainda no es- tado liquido, sucessivamente nos tubos de cultura, os quaes são le- vados ao autoclave, onde deverão permanecer durante 15 minutos sob 2 atlimosplieras. VANTAGENS DO MEU PROCESSO Si so compara o processo que acaba de sor descripto com os mais recentemente adoptados, tal seja entre outros o adoptado no Laboratorio do Piof. Straus (1) , reconhece-se que este ultimo» reclama nada monos de oito dias para a preparação, quer do caldo de carne, quer do caldo da gelose, exigindo tu lo,mais .9 esferilisações, (1) u VVurtz» — Tec!in:que bactjriologiquc* — Paris — 1802. 6 4 filtrações, das quaes a ultima a quente om papel Chardin, e ainda mais algumas decantações, no correr da operação. Entretanto, não ha pelo meu processo, senã) duts filtrações a frio em panno, com ex- clusão do filtro do papel e trez esterilisações no autoclave, de alguns minutos apenas; a duração total da operação variando entre cinco e dez horas. Tem-se por esto meio a vantagem de obter em algumas horas apenas, caldos de agar-agar peptonisxd) de uma bella côr amarella e do uma transparência bastante satisfactoria. Nenhu n dentre elles deixou ver a apparição de germeus durante muitos mezes, ficand) pois perfeitamento esterilisados. Elles t >m sido já utilisados com successo pelo meu sabio mestre Dr. J B. de Lacerda, no Laboratorio de Biologia do Ministério da Industria. Este facto não fez senão confirmar os resulta los de minhas pró- prias pesquizas tanto naquelle Laboratorio, como no de Pediatria, de meu pai o Dr. Moncorvo, cujos trabalhos bacteriológicos estão a meu cargo. Trabalhos do mesmo autor Do microbio da Coqueluche — Art. publicado no Figaro (do Rio de Janeiro). Do microbio da Coqueluche — broe.in. 1/4 — 1892, Rio de Janeiro. Microbio de la Coqueluche —trad. em hespanhol pu- blicado na Crónica Medira de Lima. . L bacteriologia no Brazil — Art. publicado 110 Figuro (ao Rio de Janeiro). La Bateriologie au Brcsil — Art. publicado 11a Recue Scienli f que (deParis). Dos Filtros e microbios— Art. publicado na Reoista Mo- derna (llio de Janeiro . Hg g iene prophglactica — Art. publicado na Revista Te - clinica ' llio de Janeiro . Da identidade do microbio da Igrnphangite e da ergsi- pela— Publicado na Reoista do Cremio dos Inter- nos dos Ilospilaes. Pesquizas S cientificas — n. I — llelatorio dos trabalhos bacteriologdcos executados no Serviço de Pediatria da Policlínica Geral. Pesquizas Scienlificas —n. 2 — Novo processo de prepa- ração dos caldos do agar-agair, sem auxilio de filtro a quente.